【摘 要】
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目的观察外源性短双链RNA(dsRNA)在转录后水平即mRNA水平降低基因表达的效率,并对其影响因素进行初步探讨。方法将体外分离培养的大鼠骨髓基质细胞,通过由本实验室配制的特殊
【机 构】
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第一军医大学珠江医院全军神经医学研究所,第一军医大学细胞生物学教研室学
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目的观察外源性短双链RNA(dsRNA)在转录后水平即mRNA水平降低基因表达的效率,并对其影响因素进行初步探讨。方法将体外分离培养的大鼠骨髓基质细胞,通过由本实验室配制的特殊培养基诱导成神经干细胞,应用人工合成的dsRNA于不同浓度转染神经干细胞,Western bloting 检测dsRNA是否能阻断转录因子Hes5的表达,0.5%锥虫蓝法测定各浓度组中培养细胞活力。结果200~300 nmol/L浓度的dsRNA能特异有效地阻断Hes5的表达,而50~200 nmol/L浓度的dsRNA有利于干细胞存活。结论dsRNA能在神经干细胞内启动RNA干扰作用,适宜浓度的dsRNA能在特异有效地阻断内源性基因的表达的同时,最大限度地保持细胞活力。
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