miR-210过表达载体的构建及Northern鉴定

来源 :河北联合大学学报：医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：mfl110

【摘要】

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①目的构建miR-210的过表达载体，为进一步研究miR-210的功能奠定良好的实验基础。②方法首先设计并合成miR-210前体序列的PCR引物，以FIEK293细胞的基因组为模板，PCR扩增包舍有mi

【作者】

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颜宇琦王梅梅熊亚南章广玲

【机构】

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河北联合大学基础医学院

【出处】

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河北联合大学学报：医学版

【发表日期】

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2012年3期

【关键词】

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质粒 MIR-210 基因表达 Plasmids. MiR -210. Gene. Expression

【基金项目】

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天津市应用基础及前沿技术研究计划项目（编号：09JCZJC17500）

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①目的构建miR-210的过表达载体，为进一步研究miR-210的功能奠定良好的实验基础。②方法首先设计并合成miR-210前体序列的PCR引物，以FIEK293细胞的基因组为模板，PCR扩增包舍有miR-210前体的序列，大小为440bp；PCR产物经过Ec0RJ和BdⅡ酶切后，与线性化的pcDNA3．1（＋）载体连接后，转化大肠杆菌，扩增、纯化获得所需质粒。以琼脂糖凝胶电泳、酶切鉴定以及基因测序鉴定其分子质量和插入片段的序列；构建的质粒转染HEK293细胞48小时后，提取小RNA，Northernbl

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