【摘 要】
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目的 研究miR-615-3p在人膀胱癌细胞系中的生物学功能及其分子机制,探讨miR-615-3p是否有可能成为膀胱癌的治疗生物标志物.方法 采用定量RT-PCR方法检测3株人膀胱癌细胞系中miR-615-3p的表达.将模拟物转染T24、UM-UC-3和J[82细胞,建立miR-615-3p的外源过表达细胞模型,用MTT法、流式细胞仪和集落形成实验检测细胞增殖和细胞周期.通过伤口愈合实验和Transwell实验评价细胞的运动能力和侵袭能力.通过荧光素酶活性测定、定量RT-PCR和Western印迹等方法确
【机 构】
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宁波大学附属人民医院泌尿外科,浙江宁波315000;宁波大学附属人民医院肿瘤放化疗,浙江宁波315000
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目的 研究miR-615-3p在人膀胱癌细胞系中的生物学功能及其分子机制,探讨miR-615-3p是否有可能成为膀胱癌的治疗生物标志物.方法 采用定量RT-PCR方法检测3株人膀胱癌细胞系中miR-615-3p的表达.将模拟物转染T24、UM-UC-3和J[82细胞,建立miR-615-3p的外源过表达细胞模型,用MTT法、流式细胞仪和集落形成实验检测细胞增殖和细胞周期.通过伤口愈合实验和Transwell实验评价细胞的运动能力和侵袭能力.通过荧光素酶活性测定、定量RT-PCR和Western印迹等方法确定miR-615-3p的目的基因.Western印迹分析miR-615-3p对上皮向间充质转化的调节作用.结果 miR-615-3p在T24、UM-UC-3、J82 3种膀胱癌细胞系及临床标本中均表达下调.克隆形成实验显示,miR-615-3p过表达可诱导T24、UM-UC-3和J82细胞发生G1期阻滞,并抑制细胞生长.miR-615-3p显著抑制膀胱癌细胞的迁移和侵袭能力.此外,HMGB3被确定为miR-615-3p的新靶点.结论 miR-615-3p可通过调节HMGB3抑制膀胱癌细胞的迁移.miR-615-3p可能是一种肿瘤抑制基因,有可能成为膀胱癌的诊断或预测生物标志物.
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