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将禽流感病毒(AIV)H5、H7、H9血凝素亚型标准血清中的IgG作为包被抗体,H5、H7、H9血凝素亚型单克隆抗体作为第二抗体.建立了双抗体夹心ELISA(AC—ELISA)方法.并优化了反应条件。结果表明:单抗和标准血清最适工作质量浓度分别为5、10mg/L,标准阳性血清于4℃包被12h.二抗作用条件为37℃作用1h,封闭条件为37℃作用1h,酶标抗体工作条件为1:5000稀释后,37C作用1h,底物作用条件为37℃作用10min。阴阳性抗原,临界值为0.274~0.332。本方法具有很高的特异性和敏