猪链球菌2型mrp基因免疫功能片段的克隆、表达及动物试验

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根据猪链球菌2型(Streptococcus suis type2)国外分离株的溶菌酶释放蛋白(Muramidase-released protein,MRP)的基因序列,设计并合成一对引物,利用PCR技术扩增了江苏分离株的开放阅读框298~827bp间529bp的基因片段,并定向克隆至pET-32a(+)表达载体中。重组质粒经限制性酶切鉴定和测序,转化至大肠杆菌BL21,经IPTG诱导,可表达分子量约42kD的蛋白。经过镍亲和层析柱层析,获得纯化的重组蛋白。以重组蛋白免疫Balb/c小鼠,以5LD50猪
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