【摘 要】
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目的:探讨miRNA-222靶向Smad2/7对牙周膜干细胞向成骨分化的影响.方法:采用流式细胞术鉴定人牙周膜干细胞表面标志物,采用油红O染色、茜素红染色和阿尔新蓝染色法验证成脂、成骨和软骨分化能力,同时验证miRNA-222、sh-Smad2和sh-Smad7对成骨分化的影响,RT-PCR检测miRNA-222在成骨分化中的表达,采用Western blot检测miRNA-222对ALP、Runx2、OCN、Smad2和Smad7蛋白的影响.结果:牙周膜干细胞表面呈阳性表达的有STRO1和CD146,阳
【机 构】
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邵阳学院附属第二医院口腔科 湖南 邵阳 422000;邵阳学院附属第二医院检验科 湖南 邵阳 422000
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目的:探讨miRNA-222靶向Smad2/7对牙周膜干细胞向成骨分化的影响.方法:采用流式细胞术鉴定人牙周膜干细胞表面标志物,采用油红O染色、茜素红染色和阿尔新蓝染色法验证成脂、成骨和软骨分化能力,同时验证miRNA-222、sh-Smad2和sh-Smad7对成骨分化的影响,RT-PCR检测miRNA-222在成骨分化中的表达,采用Western blot检测miRNA-222对ALP、Runx2、OCN、Smad2和Smad7蛋白的影响.结果:牙周膜干细胞表面呈阳性表达的有STRO1和CD146,阳性率分别为98.63％和99.16％.RT-PCR检测结果显示,在成骨分化过程中,人牙周膜干细胞中miRNA-222表达明显降低.茜素红染色结果显示,与空白组相比,miRNA-222模拟组中的红褐色矿化结节的数量明显降低(P<0.05),miRNA-222抑制组中的红褐色矿化结节的数量显著增多(P<0.05);与sh-NC相比,sh-Smad2组和sh-Smad7组红褐色矿化结节的数量显著减少(P<0.05).Western blot检测结果显示,与空白组相比,miRNA-222模拟组的ALP、Runx2、OCN蛋白表达明显降低(P<0.05),与miRNA-222模拟组相比,miRNA-222抑制组的ALP、Runx2、OCN蛋白表达显著升高(P<0.05);与空白组相比,miRNA-222模拟组的Smad2和Smad7蛋白表达明显降低(P<0.05),与miRNA-222模拟组相比,miRNA-222抑制组的Smad2和Smad7蛋白表达显著升高(P<0.001).结论:过表达miRNA-222可以减少Smad2和Smad7表达,从而抑制人牙周膜干细胞的成骨分化.
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