【摘 要】
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目的应用消减免疫法制备氨苄青霉素(Amp)多克隆抗体,为动物性食品安全快速检测及进出口贸易提供技术支持。方法以生物偶联法制备Amp-OVA与Amp-BSA,以紫外分光光度法与SDS-PAG
【机 构】
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军事医学科学院卫生学环境医学研究所,天津环境与食品安全风险监控技术重点实验室
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目的应用消减免疫法制备氨苄青霉素(Amp)多克隆抗体,为动物性食品安全快速检测及进出口贸易提供技术支持。方法以生物偶联法制备Amp-OVA与Amp-BSA,以紫外分光光度法与SDS-PAGE鉴定完全抗原,以环磷酰胺药物消减免疫,以ELISA检测免疫耐受情况;直接ELISA法检测抗体效价,竞争ELISA检测抗体特异性与灵敏度并评价消减免疫效果。结果成功合成了Amp-OVA完全抗原,消减免疫使小鼠获得了对OVA的耐受,再经多次Amp-OVA免疫后,与未消减组小鼠(血清中针对OVA的效价1:10 000)相比,消减组小鼠血清针对OVA的抗体效价(1:1 000)明显降低。结论相对于常规免疫法,采用消减免疫法更易获得针对Amp的多克隆抗体。
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