重组人肝细胞生长因子-NK4腺病毒的制备及初步鉴定

来源 :现代临床医学生物工程学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hathaway60000
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目的制备表达人肝细胞生长因子(HGF)-NK4蛋白的复制缺陷型重组腺病毒。方法酶切pcDNA3-hNK4质粒获得NK4基因编码区序列并克隆至穿梭载体构建重组pAdTrack—CMV—NK4载体,线性化后与pAdEasy-1共转化BJ5183,通过同源重组得到重组pAd—NK4病毒载体。将重组腺病毒载体转染HEK293包装细胞制备重组腺病毒,用病毒悬液感染人肝癌细胞株HepG2。RT—PCR法检测感染肿瘤细胞中NK4mRNA表达。结果酶切鉴定得到阳性pAd—NK4重组腺病毒载体,该载体能有效转染HEK293
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