【摘 要】
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目的 探讨解毒祛瘀方通过抑制磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对乳腺癌细胞他莫昔芬耐药的逆转作用及机制.方法 采用低浓度逐步加量诱导法建立乳腺癌他莫营
【机 构】
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中山大学附属第三医院药剂科,广州510630中山大学附属第三医院甲状腺乳腺外科,广州510630;
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目的 探讨解毒祛瘀方通过抑制磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路对乳腺癌细胞他莫昔芬耐药的逆转作用及机制.方法 采用低浓度逐步加量诱导法建立乳腺癌他莫营芬耐药细胞株MCF-7C,并分为空白对照组、解毒祛瘀方(2.5 g/L)组、他莫昔芬(10 μmol/L)组、他莫昔芬(10 μmol/L)+解毒祛瘀方(2.5 g/L)组、胰岛素样生长因子l(IGF-1)(10 μg/L)+他莫昔芬(10μmol/L)+解毒祛瘀方(2.5 g/L)组.采用噻唑蓝法验证MCF-7C细胞的耐药性、解毒祛瘀方的细胞毒性以及对MCF-7C细胞他莫昔芬耐药性的影响.利用流式细胞术检测细胞凋亡率.利用蛋白质印迹法检测各组MCF-7C细胞中PI3 K/Akt/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路相关蛋白的表达.结果 MCF-7C细胞对他莫昔芬的耐药指数为7.20;而经解毒祛瘀方(2.5 g/L)协同作用后,MCF-7C细胞对他莫昔芬的耐药指数为2.02.他莫昔芬+解毒祛瘀方组MCF-7C细胞凋亡率明显高于他莫昔芬组[(56.72±7.25)％比(13.24±0.76)％],同时p-PI3K[(0.37 ±0.06)比(0.68±0.07)]、p-Akt[(0.17 ±0.02)比(0.51±0.05)]、p-mTOR[(0.10±0.02)比(0.39±0.02)]蛋白表达量也明显低于他莫昔芬组(均P ＜0.05).而加入PI2K/Akt通路激活剂IGF-1后,IGF-1+他莫昔芬+解毒祛瘀方组MCF-7C细胞增殖抑制率和凋亡率较他莫昔芬+解毒祛瘀方组均明显降低(均P ＜0.05).结论 解毒祛瘀方可逆转乳腺癌细胞他莫昔芬的耐药性,其作用机制可能与抑制PI3 K/Akt/mTOR信号通路活化有关.
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