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离体培养的大鼠肝细胞在药物代谢，药物毒理学，致癌作用，肝病机理等方面的研究非常普遍。体外培养大鼠肝细胞的方法很多，大致分为非酶法和酶法。运用非酶法易损伤肝细胞，细胞产率低。运用胶原酶法尤其是Seglen的原位两步胶原酶灌流法分离培养的肝细胞不仅数量多，纯度高，形态好，而且还保留肝细胞的功能，是分离培养大鼠原代肝细胞的经典方法。但胶原酶法存在灌流装置昂贵，成本费用高，操作复杂等缺陷。2006年6～10月在经典方法的基础上建立了操作简便，成本低廉，不需要复杂设备的实验方法，现报告如下。