【摘 要】
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目的：观察谷氨酰胺对MIN6细胞胰岛素分泌和AMPK磷酸化水平的影响,以探讨谷氨酰胺影响胰岛素分泌的可能机理.方法：将MIN6细胞接种于24孔或6孔细胞培养板,实验前用含0.2%BSA和2.8
【机 构】
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上海市内分泌代谢病研究所、上海交通大学医学院附属瑞金医院内分泌代谢科、上海市内分泌代谢病临床医学中心,同济大学附属东方医院老年医学科
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目的：观察谷氨酰胺对MIN6细胞胰岛素分泌和AMPK磷酸化水平的影响,以探讨谷氨酰胺影响胰岛素分泌的可能机理.方法：将MIN6细胞接种于24孔或6孔细胞培养板,实验前用含0.2%BSA和2.8mmol/L葡萄糖KRB预培养30min,分别换入含不同浓度葡萄糖和谷氨酰胺的KRB缓冲液,培养1h,收集上清,待测胰岛素;抽提蛋白,检测蛋白磷酸化水平.结果：葡萄糖在（2.8～22.5）mmol/L浓度下能剂量依赖性地降低AMPK蛋白磷酸化,抑制其活性,胰岛素分泌和AMPK活性呈负相关.10mmol/L谷氨酰胺孵育
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