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目的探讨小鼠颅底软骨联合细胞体外原代培养的方法并了解其基本生物学特征．方法显微手术采集小鼠颅底蝶枕软骨联合组织；用胰蛋白酶和胶原酶联合消化软骨基质，获取软骨细胞；用含血清的DMEM培养基进行原代和传代细胞培养；通过显微光学成像、生长曲线描记及免疫组织化学染色观测细胞形态、活力及II型胶原合成能力．结果培养细胞在一定传代次数内稳定保持软骨细胞的典型形态和功能特征．结论手术分离配合酶联合消化是小鼠颅底软骨联合细胞体外原代培养实验的一条可靠途径．