【摘 要】
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目的研究轻微修饰低密度脂蛋白mm-LDL 激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径以及NF-kB对血小板源性生长因子B链PDGFb 表达的调控作用.方法以FeSO4修饰法制备mm-LDL,
【机 构】
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中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所病理学教研室 北京 100005
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目的研究轻微修饰低密度脂蛋白mm-LDL 激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径以及NF-kB对血小板源性生长因子B链PDGFb 表达的调控作用.方法以FeSO4修饰法制备mm-LDL,以正常LDLn-LDL 作对照,作用于培养内皮细胞后提取核蛋白,用凝胶阻滞实验检测转录因子NF-kB核转位及结合活性的变化.观察自由基清除剂probucol及PDTC对mm-LDL激活内皮细胞转录因子NF-kB的影响.通过检测报告基因探讨核因子诱导激酶(NIK)和核因子-kB抑制亚基激酶IKK 在激活内皮细胞转录因子NF-kB的信号传导途径中的作用以及mm-LDL激活的NF-kB对PDGFb基因启动子的作用.结果mm-LDL能激活培养内皮细胞转录因子NF-kB自由基清除剂probucol和PDTC对mm-LDL激活内皮细胞转录因子NF-kB无明显抑制作用.变异型NIK及IKK能显著降低报告基因荧光素酶的活性,mm-LDL激活的NF-kB还能增加带有PDGFb基因上游调控序列(-189/+43)的报告基因荧光素酶的活性.Slotblot结果显示变异型NIK能显著减少受mm-LDL刺激的内皮细胞PDGFbmRNA含量.结论mm-LDL可通过NIK-IKK途径激活内皮细胞转录因子NF-kB并促进PDGFb基因表达.
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