【摘 要】
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稀溶液中高铁细胞色素C (ferric cytochrome c,Fe(Ⅲ)-Cyt c)能被光照还原成亚铁细胞色素C(ferrous cytochromec,Fe(Ⅱ)-Cyt c),但这一研究忽略了生物体细胞的真实环境是高度
【机 构】
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大连大学生命科学与技术学院 大连116622;辽宁省生物有机化学重点实验室大连大学 大连116622
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稀溶液中高铁细胞色素C (ferric cytochrome c,Fe(Ⅲ)-Cyt c)能被光照还原成亚铁细胞色素C(ferrous cytochromec,Fe(Ⅱ)-Cyt c),但这一研究忽略了生物体细胞的真实环境是高度拥挤的,因此采用紫外可见、同步荧光及圆二色谱光谱法研究了大分子拥挤环境中光诱导Cyt c的还原过程及其对外界环境的依赖情况.UV-Vis光谱和同步荧光光谱结果表明,拥挤试剂葡聚糖70 (Dextran70)和聚蔗糖70 (Ficoll70)的加入利于Cyt c光还原的进行,且Ficoll70存在时Cyt c光还原程度远高于Dextran70存在时；Dextran70和Ficoll70环境中光诱导Cyt c还原的最适温度分别为37℃和25℃,定波长280 nm光照射利于Cyt c还原；Cytc的光还原程度随着Dextran70浓度增加而增大,Ficoll70环境中Cyt c的最适光还原浓度为100 g·L-1;拥挤环境下Met,Trp,Tyr和Phe的存在对光诱导Cyt c的还原过程依Phe＞ Tyr＞ Trp＞ Met顺序有催化促进作用；CD光谱结果表明光照射稀溶液中Cyt c蛋白还原后,其α-螺旋含量降低,β-折叠含量升高,而光照射拥挤环境中Cyt c还原后蛋白的二级结构基本没变化.结果表明拥挤试剂具有稳定蛋白质二级结构的作用,且影响光还原Cyt c的电子传递过程及效率.
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