【摘 要】
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旨在研究牛卵泡发育过程中可卡因-苯丙胺调节转录肽(Cocaine-and amphetamine-regulated transcript,CART)相互作用蛋白(Protein-protein interaction,PPI)。选择4头10月龄同
【机 构】
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山西农业大学生命科学学院; 山西农业大学动物科技学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金(31172211);农业部948项目(2010-Z43);山西省横向协作与委托项目(2010HX54);山西省回国留学人员科研资助项目(2014-重点5);山西省科技攻关项目(20130311027-2);山西省人事厅人才引进项目;山西农业大学引进人才博士科研启动费(2014ZZ04);科研管理费资助重大项目和标志性成果培育项目(71060003)
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旨在研究牛卵泡发育过程中可卡因-苯丙胺调节转录肽(Cocaine-and amphetamine-regulated transcript,CART)相互作用蛋白(Protein-protein interaction,PPI)。选择4头10月龄同期发情的健康母牛,B超检测卵泡达8~12mm,屠宰并采集、分离卵泡颗粒细胞(Granulosa cells,GCs)后,进行总蛋白提取,兔抗CART一抗沉淀CART及其相互作用蛋白,经Protein G-Agarose磁珠吸附分离,多次洗涤去除盐分和杂蛋白,洗脱蛋白复合体并酶解,LC-ESI-Q-TOF质谱分析(Mass spectrometry,MS)及数据库比对。结果显示:共鉴定蛋白质组分111个;经Cytoscape V3.1.0分析,有81个蛋白符合功能模块,并构建蛋白相互作用网络图;同时对相互作用蛋白进行功能富集性分析,共分为3大类34组:其中分子功能占11.73%,生物学过程占46.93%,细胞组分占41.34%。α2巨球蛋白(A2M)和波形蛋白(VIM)与CART相互作用的相关系数最大;CART与NALP1、SERPINH1和PDIA6具有负调控应答的功能,提示可能参与牛卵泡发育过程的调控。
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