小鼠胆碱乙酰基转移酶慢病毒载体的构建及其在RAW264.7细胞中的表达

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目的:构建胆碱乙酰基转移酶(ChAT)过表达的慢病毒载体,转染小鼠腹腔巨噬细胞系RAW264.7,上调细胞中ChAT表达.方法:利用PCR方法从小鼠cDNA文库中调取ChAT基因,克隆至pGC-FU慢病毒载体上,经PCR和测序鉴定.用pGC-FU-ChAT质粒转染RAW264.7后,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(GFP)表达,real-time PCR检测RAW264.7细胞中ChAT基因表达丰度.结果:融合表达GFP的慢病毒载体pGC-FU-ChAT感染RAW264.7细胞的效率可达80%以上,感染细胞
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