T载体表达蛋白的分子生物学综合实验设计

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为弥补传统分子生物学实验中α-互补法筛选重组子以及蛋白质的原核诱导表达两项实验相对独立、缺乏连续的不足,探索通过设计基因克隆和蛋白表达一体化的综合性实验,以强化学生对阅读框的认识.分子生物学实验中的综合性实验设计拓展了实验教学的广度与深度,为进一步提升学生的知识、能力和素养奠定基础.
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基于大腹园蛛的两种蛛丝基因构建三部分嵌合的重组蛛丝蛋白iN7RC,在大肠杆菌中成功表达,通过纯化得到产量为34 mg/L的高纯度分子质量高达165.2 ku的重组蛛丝蛋白.不同pH值下的圆二色谱分析显示iN7RC蛋白质的二级结构组分中的α-helix结构占比随着pH值的降低明显减少.通过手工牵拉的方式获得具有高强度和高延展性的重组蛛丝纤维,为蛛丝仿生材料的广泛应用奠定基础.
为了解决纯角蛋白多孔材料力学性能差的问题,利用巯基-烯点击化学反应制备聚乙二醇二甲基丙烯酸酯(PEGDMA)改性角蛋白,在此基础上,将改性角蛋白与海藻酸钠(SA)共混得到角蛋白多孔材料,并利用交替矿化法对多孔材料进行仿生矿化,最终制备了仿生矿化角蛋白多孔材料.红外(FTIR)测试显示,PEGDMA成功接枝到角蛋白上,经过改性的角蛋白,其多孔材料弹性得到明显提高.扫描电子显微镜(SEM)、红外以及X射线衍射(XRD)测试结果均显示,HAP成功沉积于多孔材料表面,多孔材料表面形貌变得粗糙.经过矿化,角蛋白多孔
以川东北丘陵地区林内(生境Ⅰ)、林窗(生境Ⅱ)和林缘(生境Ⅲ)下的密蒙花(Buddleja officinalis Max-im.)为研究对象,测定其盛花期株高、基径、花序长、叶面积、黄酮类化合物含量和叶片叶绿素含量、光响应曲线及光合日变化,分析密蒙花对不同生境的适应性,运用5个常用模型对3个生境下的密蒙花光响应曲线进行拟合对比,探讨适合用于拟合密蒙花光响应曲线的模型.研究结果表明:3个生境中林窗的株高、基径、花序长和叶面积均显著高于林内和林缘生境林窗(P<0.05),黄酮类化合物含量林窗显著高于林内和林
为探讨不同光照强度对中缅树鼩行为变化、学习记忆能力和氧化应激的影响,分别于光照628、1256和2512 lx条件下测定体重、摄食量、Y型迷宫正确反应率和行为变化,并测定丙二醛(Malondialdehyde,MDA)浓度、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase,AChE)和一氧化氮合酶(Nitric oxide synthase,NOS)浓度,以及SOD、AChE和NOS的活性.结果表明,第28天时3组之间体重差异显著,
木蠹象属Pissodes Germa隶属于鞘翅目Coleoptera象甲科Curculionidae.该属目前全世界已记录种类46种,分布于美洲的有29种,分布在欧洲和亚洲有18种,分布在中国的有8种.木蠹象属的许多种类是针叶树的重要害虫,主要危害松树Pinus Linn、云杉Picea Dietr和冷杉Abies Mill等针叶树,是近年来中国西南地区发生较严重的林业病虫害之一.由于它们的寄主在中国分布广泛且危害非常严重,因此急需提高警惕,防止它们通过贸易渠道或人为携带等传入中国其他地区.对中国木蠹象的
稳态磁场对肿瘤具有抑制效应,与药物联用以提高药效的研究取得多项进展.系统分析稳态磁场联合常用药物如平阳霉素、顺铂、阿霉素、5-氟尿嘧啶、紫杉醇、维生素D、辣椒素等对肿瘤细胞的生物学效应,发现特定强度的稳态磁场联合特定药物,可以显著降低药物的使用浓度和毒副作用,但对部分肿瘤具有拮抗作用或无明显影响.因此,稳态磁场与药物联用的生物学效应依赖于药物种类、磁场强度和细胞类型等.综述磁场与不同药物联用效应的研究进展,为临床上稳态磁场和药物联用提供参考.
为了获得耐受各种不良环境的多环芳烃(PAHs)降解菌,利用多环芳烃(菲和芘)、重金属(Cu2+、Cr6+)以及氮源缺乏培养基从南阳石油污染土壤中分离筛选一株耐受不良环境的菲芘降解菌,通过形态学特征和分子生物学方法鉴定菌株,并研究菌株对重金属Cr6+和Cu2+、氮源缺乏及酸碱的耐受程度,进一步探究在这些不良环境下菌株对多环芳烃菲和芘的降解效果.结果表明,菌株属于根瘤菌属,命名为F3-1.在液体培养基中,菌株F3-1对重金属Cr6+和Cu2+的耐受质量浓度均为20 mg/L;在氮源缺乏的情况下,菌株能够正常生
为明确高抗氧化活性壳寡糖制备的木瓜蛋白酶法工艺,以壳聚糖为原料,酶解产物的DPPH自由基清除率和总还原力为检测指标,使用单因素试验探究酶底比、酶解温度、pH值、酶解时间对酶解产物抗氧化活性的影响,确定最佳酶解条件为酶底比20%、酶解温度50.00℃、pH 4.80.在单因素试验的基础上,对酶解温度、酶解时间和pH值进行Box-Behnken响应面设计并优化得到最佳酶解条件为酶解温度47.74℃、酶解pH 4.81、酶解时间1 h,预测壳聚糖酶解物的DPPH自由基清除率为65.10%,总还原力为0.323.
为获得纤溶酶-α2-纤溶酶抑制剂(plasmin-α2-plasmin inhibitor complex,PIC)与凝血酶-抗凝血酶(thrombin-antithrombin,TAT)单克隆抗体及建立相应复合物的检测方法,需要制备高纯度的PIC与TAT复合物.以脂血血浆为研究材料,进行血浆前处理,通过尿激酶激活血浆,经Lysine-sepharose亲和层柱,最后获得高纯度的PIC;处理过的血浆经过氯化钡吸附、饱和硫酸铵沉淀后,获得抗凝血酶(antithrombin,AT)与凝血酶原(prothrom
基于装配式建筑发展能力视角,选取2016-2018年31个省份的实际数据,运用通径分析方法,分析经济能力、基础能力、政策环境能力三个维度影响因素对装配式建筑发展速度和发展规模两个层面的影响.研究发现,目前政策环境对发展速度促进作用最直接和显著,构件厂产能为代表的基础设施能力对发展规模直接作用最显著,以GDP为代表的经济能力起着间接支持作用,且对发展规模效果比速度显著.提出政府应加大政策环境支持,持续孵化产业和市场环境;配套设置基础能力,避免产能不足的限制;注重经济能力的支持保障,实现装配式建筑发展由政府主