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目的将弓形虫14-3-3(Toxo14-3-3)信号转导蛋白基因亚克隆入表达载体pBK-CMV,用于寻找弓形虫新的诊断和候选疫苗分子以及寄生虫-宿主相互作用等研究。方法根据Toxo14-3-3核苷酸序列设计并合成一对引物,以弓形虫速殖子mRNA为模板,RT-PCR法扩增Toxo14-3-3 DNA片段,通过TA连接将其克隆入pGEM-T载体、经测序证实序列完全正确。再将该目的基因亚克隆入表达载体pBK-CMV中,转化大肠杆菌XL1-blue,提取质粒,经双酶切法和以该质粒为模板PCR法证实。结果 Toxo