广西HIV-1 B亚型假病毒的构建

来源 :实用医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cyw87325
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的针对广西HIV-1 B亚型毒株构建一种优化的假病毒耐药检测模型,为表型耐药检测提供成本较低、简便易行的研究工具。方法从质粒p SV-EGFP中扩增出EGFP基因,采用双酶切法将EGFP基因克隆至骨架质粒p NL4-3.Luc.E-R-,以此构建假病毒重组骨架质粒;采用RT-PCR方法从HIV-1 B亚型慢性感染者RNA中获得包膜蛋白基因,采用双酶切法将env基因克隆至真核表达质粒pc DNATM3.1(+),以此构建重组包膜质粒;单转染重组包膜质粒至293t细胞验证表达;共转染重组质粒至293t细胞获得假病毒;采用与TZM-b1细胞共培养法,通过荧光表达检测验证假病毒感染性。结果两种质粒以质量比2:1(pc DNA3.1-env:p NL4-3.EGFP.E-R-)共转染至293t细胞,48 h后收集细胞上清获得假病毒。将假病毒加入到TZM-bl细胞共培养48 h后,可以观察到荧光表达。结论带有EGFP基因重组假病毒的系统构建成功。
其他文献
针对目前数字水印技术无法有效抵抗几何攻击的问题,本文提出了一种基于QR码的Contourlet域数字水印算法。将文字信息进行QR码编码作为水印信息。首先,将载体图像进行Contourl
本文根据人居环境的理论,探讨住宅设计在人居环境中所扮演的"角色"。通过人居环境中的自然环境和人文环境两大块面,分析住宅设计的本质和功能,各种资源的利用对住宅设计的影
随着新课程标准的不断推行,小学语文和初中语文都进行了一定的改革。在新的教学背景下,如何根据小学和初中语文教学的特点与要求,进行恰当的课程衔接是一个非常重要的问题。自然
低温催化氧化去除CO涉及到人类生产和生活的各个方面。同时,CO氧化反应常被用作模型反应来研究催化材料的结构和催化行为。因此,研究CO的消除无论是在基础研究还是实际应用方
<正>0引言僵尸网络(Botnet)是指采用一种或多种传播手段,将大量主机感染僵尸(bot)程序病毒,从而在控制者和被感染主机之间所形成的一个可一对多控制的网络。攻击者(botmaster
五代两宋时期,婉约词为词坛正宗,以言情为主,以娱宾遣兴为功能,词被视为不登大雅之堂的"小道"、"诗余"。由元迄明,"小道"、"小乘"的词体观一仍其旧。清代词坛超越婉约词的艳
文体活动开展是一个单位人文活动活跃性的表现,是体现凝聚力和人文氛围的一个重要的形式,所以在具体的工会工作中,文体活动就显得非常的关键。因此,本文通过对工会组织的本质
提到“快乐课堂”,这几天我一直在思考,在我们学校文化“自主、愉悦、高效、体验”的教学理念中,我觉得自主是最重要的基础,愉悦是最大的亮点,而高效是最终极的目的,体验是最
口语交际教学是语文教学的重要组成部分之一,是实施素质教育的主阵地,口语交际的训练目标应当包括提高能力和培养交际习惯两方面。然而前当前教学中,很多语文教师并没有对口语教
小班幼儿是掌握语音、学说普通话的关键期。幼儿已具备了一些口语交往的基本能力,但语言的表达能力仍需继续培养。儿歌以其独特的韵律和韵脚,学习起来朗朗上口,深受幼儿的喜爱,但