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根据牛传染性鼻气管炎病毒gB基因序列和赤羽病病毒(AKAV)的S基因序列,设计了2对针对这2种病毒的特异引物和探针,建立了同时检测两种病的基因芯片方法.设计合成寡核苷酸探针,用荧光素Cy3标记正向引物的5′端.实验确定了适宜杂交温度为38℃.将建立的基因芯片方法用于检测,IBRV的灵敏度为0.013pg/25μL,AKAV的灵敏度为0.104pg/25μL,同时通过对牛的腺病毒、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛水泡性口炎病毒(VSV)、口蹄疫病毒(FMDV)、牛白血病病毒(BLV)等的检测,没有交叉反应,说明其特异性强.本试验方法的建立对于加强进出口牛的IBRV和AKAV检验检疫具有十分重要的意义.