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目的
通过体外研究,探讨CCAAT增强子结合蛋白-α(C/EBP-α)诱导的肝细胞和肝星状细胞(HSCs)自噬和凋亡的差异。
方法构建腺病毒介导的C/EBP-α基因(Ad-C/EBP-α),分别以50、100、200 MOI感染大鼠BRL-3A细胞系和HSC-T6细胞系,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况;应用Western blot方法检测自噬标志蛋白LC3Ⅰ/LC3Ⅱ的表达,探讨C/EBP-α诱导2种细胞的自噬及凋亡途径有无差异。
结果流式细胞仪显示HSC-T6细胞系从50 MOI时即出现显著凋亡,且随剂量上升,凋亡率进一步升高,上升趋势差异有统计学意义(P<0.05);BRL-3A细胞系并无明显变化。Western blot显示HSC-T6LC3Ⅰ/LC3Ⅱ从50 MOI时水平明显下降,且剂量越高,下降幅度越大,下降趋势差异有统计学意义(P<0.05);BRL-3A细胞系并无明显变化。
结论C/EBP-α基因对肝星状细胞的自噬有剂量依赖的抑制作用,对其凋亡有剂量依赖的促进作用;但对肝细胞的自噬及凋亡无明显影响。