不同碘水平对哺乳期大鼠乳腺组织摄碘丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响

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目的

观察不同碘营养水平对哺乳期大鼠乳腺组织丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)激酶(mitogen extracellular kinase,MEK)、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)及钠碘转运体(Na+-I- Symporter,NIS)的表达及血清雌二醇(estradiol,E2)水平的影响,探讨在差异性碘饮食中哺乳期乳腺MEK-ERK信号通路的摄碘机制。

方法

Wistar大鼠130只(雌鼠100只、雄鼠30只),按体质量采用随机数字表法将雌鼠分为5组:①A组(低碘1组):低碘饲料(碘含量为16.15 μg/kg)+不加碘的去离子水;②B组(低碘2组):低碘饲料+碘含量为5.00 μg/L的去离子水;③C组(适碘组):普通饲料(碘含量为350.00 μg/kg)+碘含量为50.00 μg/L的去离子水;④D组(高碘1组):普通饲料+碘含量为3 000.00 μg/L的去离子水;⑤E组(高碘2组):普通饲料+碘含量为10 000.00 μg/L的去离子水。每组20只大鼠,饲养90 d后,将5组雌鼠与雄鼠合笼,交配后,将雄鼠取出,每只雌鼠单独喂养;在生育第10天,将母鼠处死,收集血液离心后获取血清,采用放射免疫法检测E2水平;取出乳腺组织,应用实时荧光定量PCR法、蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测MEK、ERK及NIS mRNA和蛋白的表达。

结果

哺乳期大鼠E2水平组间比较差异有统计学意义(F= 12.765,P < 0.05)。其中A组[(1.22 ± 0.46)ng/L]明显高于C组[(0.77 ± 0.38)ng/L],D组[(0.41 ± 0.21)ng/L]、E组[(0.36 ± 0.15)ng/L]均低于C组,差异均有统计学意义(P < 0.01或< 0.05)。哺乳期大鼠乳腺NIS、MEK、ERK mRNA表达组间比较差异均有统计学意义(F= 14.916、10.757、45.172,P均< 0.05)。其中A组(0.75 ± 0.40)、B组(0.89 ± 0.51)NIS mRNA表达明显高于C组(0.53 ± 0.31,P < 0.05或< 0.01),E组(0.30 ± 0.24)NIS mRNA表达明显低于C组(P < 0.05);A组(1.61 ± 0.48)、B组(1.46 ± 0.67)MEK mRNA表达明显高于C组(0.85 ± 0.51,P均< 0.01);A组(1.45 ± 0.31)ERK mRNA表达明显高于C组(1.06 ± 0.21,P < 0.01),D组(0.72 ± 0.15)、E组(0.53 ± 0.14)ERK mRNA表达明显低于C组(P均< 0.01)。哺乳期大鼠乳腺NIS、MEK、总ERK、磷酸化ERK(p-ERK)蛋白表达组间比较差异均有统计学意义(F= 4.510、8.953、16.154、6.683,P均< 0.05)。其中A组(1.67 ± 0.97)NIS蛋白表达明显高于C组(0.87 ± 0.43,P < 0.05);B组(1.17 ± 0.35)MEK蛋白表达明显高于C组(0.74 ± 0.15,P < 0.05),E组(0.54 ± 0.12)MEK表达明显低于C组(P < 0.05);A组(1.27 ± 0.19)总ERK蛋白表达明显高于C组(0.90 ± 0.24,P < 0.05),E组(0.58 ± 0.12)总ERK蛋白表达明显低于C组(P < 0.05);E组(0.55 ± 0.19)p-ERK蛋白表达明显低于C组(0.86 ± 0.20,P < 0.05)。

结论

哺乳期大鼠血清E2水平随着碘摄入水平的增加而降低,MEK、ERK的表达随之下降,进而使NIS的表达也相应下调。

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