【摘 要】
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目的 探讨人主动脉平滑肌细胞(HAoSMC)的体外分离及培养方法.方法 人升主动脉组织取自在北部战区总医院接受外科主动脉置换手术的A型主动脉夹层患者.无菌条件下撕除主动脉内膜,获得中膜,将中膜剪成约2 mm长的组织块,用0.15％的Ⅱ型胶原酶消化组织块10 h,吹打后接种于6孔板中,显微镜下观察培养不同时间点的细胞形态特征,免疫荧光染色法检测平滑肌细胞标志物SMα-actin及SM 22α的表达.结果 胶原酶消化法可成功将平滑肌细胞从主动脉中膜分离出来.分离出的细胞在培养第1天开始贴壁,第7天呈现典型长梭
【机 构】
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北部战区总医院 心血管内科,辽宁 沈阳110016;锦州医科大学研究生院,辽宁 锦州121001;北部战区总医院 心血管内科,辽宁 沈阳110016
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目的 探讨人主动脉平滑肌细胞(HAoSMC)的体外分离及培养方法.方法 人升主动脉组织取自在北部战区总医院接受外科主动脉置换手术的A型主动脉夹层患者.无菌条件下撕除主动脉内膜,获得中膜,将中膜剪成约2 mm长的组织块,用0.15％的Ⅱ型胶原酶消化组织块10 h,吹打后接种于6孔板中,显微镜下观察培养不同时间点的细胞形态特征,免疫荧光染色法检测平滑肌细胞标志物SMα-actin及SM 22α的表达.结果 胶原酶消化法可成功将平滑肌细胞从主动脉中膜分离出来.分离出的细胞在培养第1天开始贴壁,第7天呈现典型长梭形,第14天基本融合.培养的细胞SMα-actin及SM 22α染色阳性.结论 本研究采用酶消化法成功从主动脉夹层患者标本中分离并培养出HAoSMC,为进一步阐明主动脉疾病的发病机制奠定了基础.
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