论文部分内容阅读
目的 将新型自杀基因——酿酒酵母菌胞嘧啶脱氨酶基因（YCD）导入人T淋巴细胞，在体外证明YCD自杀基因体系的有效性，为自杀基因应用于体内防治移植物抗宿主病（GVHD）提供了理论基础。方法利用脂质体法转染包装细胞293T，分离、培养人外周血单个核细胞，病毒上清转染活化后的人T细胞，应用Puromycin筛选扩增，利用反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测目的基因的表达，酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测细胞因子的分泌情况，噻唑蓝（MTT）法检测其对前体药物的敏感性。结果通过高速离心富集RV、CH-