五日热巴通体重组外膜蛋白HbpA的研制和抗原性分析

来源 :寄生虫与医学昆虫学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wohaishixinyonghu

【摘要】

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为克隆并表达五日热巴通体外膜蛋白HbpA的基因,并对其抗原性进行初步分析,采用PCR方法从五日热巴通体基因组DNA扩增hbpA基因,将目的基因片段插入原核表达质粒pET32a（＋）,构建重组

【作者】

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王君王锡乐陈梅玲李冠武温博海

【机构】

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军事医学科学院微生物流行病研究所,汕头大学医学院

【出处】

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寄生虫与医学昆虫学报

【发表日期】

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2008年1期

【关键词】

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五日热巴通体外膜蛋白基因表达免疫反应性 Bartonella quintana Outer membrane protein Gene expre

【基金项目】

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国家科技攻关项目（2003BA712A04-07）

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为克隆并表达五日热巴通体外膜蛋白HbpA的基因,并对其抗原性进行初步分析,采用PCR方法从五日热巴通体基因组DNA扩增hbpA基因,将目的基因片段插入原核表达质粒pET32a（＋）,构建重组质粒pET32a（＋）-hbpA;将构建的重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）并诱导目的基因表达,以SDS-PAGE电泳以及免疫印迹实验分析表达的目的蛋白。SDS-PAGE电泳分析发现pET32a（＋）-hbpA转化菌高效表达一48kDa重组蛋白;免疫印迹分析发现该蛋白与其免疫血清发生强烈反应;间接免疫荧光分析发现该

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