鸡肠炎沙门氏菌转座突变体库的构建及减毒菌株的筛选

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为筛选减毒肠炎沙门氏菌(s.enteritidis)菌株,本研究以含有Mini—Tn5转座子的重组自杀质粒pUT对S.enteritidisSM6株进行转座诱变,利用双亲本滤膜杂交方法与供体菌E.coliβ2155进行接合转移,构建并优化接合转移体系,利用卡那抗性和DAP营养缺陷培养平板筛选法构建了SM6的随机转座突变体库。其中包含5个子库,共计获得364株突变体,经PCR鉴定表明转座子均插入SM6株的基因组中。通过Caco-2细胞侵袭试验筛选S.enteritidis侵袭力减弱并在细胞内增殖受到抑制的减
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