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在参考传统的优化方法的基础上，将遗传算法用于等度反相色谱多元流动相分离条件的优化。详细介绍了基于线杂交和面变异的遗传算法的原理及其用于液相色谱分离条件优化的过程。将此法用于9种小肽的反相离子对色谱分离条件的优化，经过3次寻优操作，确定了最佳分离条件，实验保留值与预测值的平均相对偏差为0．75％，优化结果比较理想。