甲基化CpG结合结构域蛋白的原核表达及应用

来源 :四川大学学报:自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sanhaijin123
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本文构建了甲基化 CpG 结合结构域(MBD)蛋白的原核表达质粒,并表达了 GST-MBD融合蛋白,采用GST柱对该融合蛋白进行纯化。体外 pull-down 实验发现,GST-MBD融合蛋白能够与小鼠胚胎成纤维细胞MEF中 oct4基因的启动子 DNA 结合,验证了该蛋白的体外生物活性。利用相同的实验方法,发现 GST-MBD融合蛋白能够与 MEF 细胞中inhbb基因的启动子区结合,而不能与小鼠胚胎干细胞 R1中的inhbb基因的启动子区 DNA 结合,同时采用半定量PCR方法检测到inhbb基因在R
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