pTRUF11-GFP—Bip载体的构建及真核表达鉴定

来源 :徐州医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wanghongtao11
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目的构建Bip蛋白真核表达重组体用于缺血性脑损伤机制的研究。方法用RT—PCR方法获得Bip的cDNA;与TOPO载体连结,连接产物转化大肠杆菌DH5α进行筛选、序列测定;Bip cDNA片段亚克隆到真核表达载体pTRUF11-GFP;重组体pTRUF11-GFP—Bip转到293H细胞,Westernblot鉴定Bip的表达。结果①经RT—PCR法得到了Bip的双链cDNA;②Bip测序图谱与GeneBank报道完全一致;③酶切鉴定能观察到Bip和pTRUF11-GFP两条带;④Western blot
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