维甲酸对人子宫颈癌细胞系HeLa细胞间隙连接蛋白转导途径调控作用的研究

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目的 探讨维甲酸对人子宫颈癌细胞系HeLa 细胞间隙连接蛋白(Cx)43信号转导途径的调控作用。方法 应用特异性钙指示剂(Fluo-3 AM)在激光扫描共聚焦显微镜下动态观察维甲酸作用后的细胞质内信号转导分子游离钙的分布及强度变化。采用流式细胞仪、结合蛋白印迹技术分析,检测外源信号分子对Cx43的表达以及蛋白酪氨酸磷酸化状态的影响。结果 HeLa细胞内游离钙经维甲酸作用后明显超载,细胞内游离钙浓度([Ca2+]i) 由静息状态下的35.73 μmol/L上升至58.16 μmol/L。流式细胞仪分析,Cx43阳性细胞表达率由1.9%上升至26.3%。蛋白印迹技术分析,HeLa细胞出现Cx43酪氨酸磷酸化。结论 维甲酸对HeLa细胞Cx43信号转导途径的调控是在细胞质内游离钙的参与下,使Cx43阳性细胞表达率上升,并在酪氨酸位点出现明显的磷酸化作用下实现的。
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