枝状枝孢霉ＭＤ２的ＵｎｉｇｅｎｅＡ０３２３１的克隆及原核表达分析

来源 :中南民族大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：nxf_2004_0

【摘要】

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为研究真菌紫杉醇合成相关基因的功能，从产紫杉醇真菌枝状枝孢霉ＭＤ２中克隆了ＵｎｉｇｅｎｅＡ０３２３１的ＤＮＡ和ｃＤＮＡ全长序列（９１８ｂｐ）．结果表明：该基因不含内含子，其编码产物含３０５个氨基酸，与短链脱氢酶／还原酶一致性为６４％，预测蛋白分子

【作者】

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张鹏周兰席晓圆德格柯友胜刘盼宋发军张鹏

【机构】

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中南民族大学生命科学学院生物技术国家民委重点实验室/武陵山区特色资源植物种质保护与利用湖北省重点实验室

【出处】

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中南民族大学学报：自然科学版

【发表日期】

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2018年1期

【关键词】

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枝状枝孢霉紫杉醇基因克隆原核表达 Cladosporium cladosporioides taxol gene clone prokaryotic e

【基金项目】

：

国家自然科学基金资助项目(31370118),湖北省本科高校“生物技术专业综合改革”试点资助项目(GJZ15006),中央高校基本科研业务费专项资金资助项目(CZW15019),校企合作资助项目(HZY14024),中南民族大学大学生创新创业资助项目(SCX1725,GCX1725,SKYCX17020)

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为研究真菌紫杉醇合成相关基因的功能，从产紫杉醇真菌枝状枝孢霉ＭＤ２中克隆了ＵｎｉｇｅｎｅＡ０３２３１的ＤＮＡ和ｃＤＮＡ全长序列（９１８ｂｐ）．结果表明：该基因不含内含子，其编码产物含３０５个氨基酸，与短链脱氢酶／还原酶一致性为６４％，预测蛋白分子量为３３０７１．５Ｄａ，不存在信号肽，含有２个跨膜结构．ＵｎｉｇｅｎｅＡ０３２３１以单拷贝形式存在于基因组，在０～３０ｈ内其表达水平随茉莉酸甲酯诱导表现为先升高后降低．构建了该基因的原核表达菌株，初步优化了其在大肠杆菌ＢＬ２１中的诱导表达条件为：诱导温度２８℃，Ｉ

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