【摘 要】
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目的 探讨组织蛋白酶B在光老化皮肤中的表达意义.方法 6例成人曝光和非曝光皮肤标本,采用免疫组化法定位及对比组织蛋白酶B的表达.体外培养原代人皮肤成纤维细胞,甲氧沙林+UVA法体外诱导培养细胞光老化.衰老相关-β-半乳糖苷酶染色证明老化诱导成功.Western印迹技术及RT-PCR对比检测光老化成纤维细胞及正常成纤维细胞组织蛋白酶B蛋白及基因表达.结果 6例成人曝光和非曝光活体皮肤均见组织蛋白酶B
【机 构】
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510630,广州,中山大学附属第三医院皮肤科,510630,广州,中山大学附属第三医院皮肤科,510630,广州,中山大学附属第三医院皮肤科,510630,广州,中山大学附属第三医院皮肤科,5106
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目的 探讨组织蛋白酶B在光老化皮肤中的表达意义.方法 6例成人曝光和非曝光皮肤标本,采用免疫组化法定位及对比组织蛋白酶B的表达.体外培养原代人皮肤成纤维细胞,甲氧沙林+UVA法体外诱导培养细胞光老化.衰老相关-β-半乳糖苷酶染色证明老化诱导成功.Western印迹技术及RT-PCR对比检测光老化成纤维细胞及正常成纤维细胞组织蛋白酶B蛋白及基因表达.结果 6例成人曝光和非曝光活体皮肤均见组织蛋白酶B阳性染色,和非曝光部位相比,曝光部位皮肤阳性染色A值降低.Western印迹结果示,成纤维细胞光老化诱导组蛋白表达较UVA诱导组、甲氧沙林孵育组及空白组明显下调.光老化成纤维细胞诱导后l周,组织蛋白酶B与内参的灰度比由28.099±0.054下降为25.103±0.102,诱导后3周灰度值进一步下降为17.693±0.099.实时定量RT-PCR结果示,光老化细胞组织蛋白酶B mRNA表达下调为正常组的64%(P<0.05).结论 组织蛋白酶B在光老化皮肤及老化成纤维细胞中表达降低,且有时间依赖性,与光老化皮肤自我修复能力下降有关。
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