【摘 要】
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通过设计简并引物和TAIL-PCR的方法从Streptomyces fradiaevar.k11中克隆得到一个β-l,4-甘露聚糖酶编码基因manS221,其全长1 359 bp,编码452个氨基酸,前端28个氨基酸为预测
【机 构】
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湖南农业大学食品科技学院,中国农业科学院饲料研究所
【基金项目】
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国家转基因生物新品种培育重大专项(2009ZX08003-020B), 国家肉鸡产业技术体系(nycytx-42-G2-05)资助
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通过设计简并引物和TAIL-PCR的方法从Streptomyces fradiaevar.k11中克隆得到一个β-l,4-甘露聚糖酶编码基因manS221,其全长1 359 bp,编码452个氨基酸,前端28个氨基酸为预测信号肽。构建表达载体pET-28a-manS221并转化大肠杆菌BL2l(DE3),特异性表达manS221基因,重组的甘露聚糖酶通过Ni-NTA亲和层析纯化。酶学性质分析表明,重组甘露聚糖酶最适温度为52℃,最适pH值为6.0,在pH5.0~9.0的范围内有良好的稳定性,并且对中性蛋白
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