由犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)引起的犬细小病毒病是我国出入境口岸宠物检疫的重要疫病。为了提高检疫效率,本研究拟建立检测CPV的实时荧光重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Chain Amplification,RPA)方法并进行评价。本研究根据CPV衣壳蛋白基因序列设计RPA引物,以GB/T27533-2011中的PCR方法作为参照,通过检测其它4种犬病毒和3种其它种属的细小病毒来分析实时荧光RPA的特异性,通过检测不同浓度的模板分析实时荧光RPA的灵敏度,通过检测CPV病死或阴性犬的不同组织、尿、粪便等样本以及7株CPV野毒株,来分析实时荧光RPA的稳定性。结果表明,本研究建立的实时荧光RPA特异性好、灵敏度高,检测临床组织、体液、粪便样本以及野毒株时都具有良好的稳定性。本研究建立的实时荧光RPA可满足CPV快速检测要求。