【摘 要】
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目的 探讨烟酰胺N甲基转移酶(NNMT)在食管癌中的表达及机制.方法 采用免疫组化法检测84例食管癌及癌旁正常组织中NNMT的表达,将siRNA NC(对照组)、siRNA NNMT(siRNA组)转染到EC9706食管癌细胞,Realtime PCR检测NNMT mRNA表达,CCK-8实验检测细胞活力,Hoechst染色检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测NNMT、Wnt1a、β-catenin、CyclinD1、MMP-9蛋白表达.结果 NNMT在食管癌
【机 构】
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江南大学附属医院肿瘤放疗科,江苏 无锡 214122
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目的 探讨烟酰胺N甲基转移酶(NNMT)在食管癌中的表达及机制.方法 采用免疫组化法检测84例食管癌及癌旁正常组织中NNMT的表达,将siRNA NC(对照组)、siRNA NNMT(siRNA组)转染到EC9706食管癌细胞,Realtime PCR检测NNMT mRNA表达,CCK-8实验检测细胞活力,Hoechst染色检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测NNMT、Wnt1a、β-catenin、CyclinD1、MMP-9蛋白表达.结果 NNMT在食管癌组织(59/84,70.23％)中的阳性表达显著高于癌旁正常组织(4/84,4.69％)(χ2=76.825,P<0.05).与对照组比较,siRNA组NNMT mRNA[(0.56±0.05)vs(1.00±0.10),t=5.903,P<0.05]及蛋白表达量[(0.74±0.07)vs(1.56±0.16),t=7.321,P<0.05]均下调,细胞活力[(0.39±0.04)vs(0.62±0.06),t=5.832,P<0.05]降低,细胞凋亡率[(32.46±3.24)％vs(3.31±0.32)％,t=6.431,P<0.05]提高,细胞侵袭数目[(32.47±3.25)vs(189.32±18.90),t=6.321,P<0.05]减少,Wnt1a[(0.41±0.04)vs(0.15±0.01),t=5.842,P<0.05]、β-catenin[(0.34±0.03)vs(0.17±0.02),t=5.216,P<0.05]、CyclinD1[(1.12±013)vs(0.39±0.04),t=6.438,P<0.05]、MMP-9[(0.87±0.09)vs(0.31±0.03),t=5.128,P<0.05]表达量均下调.结论 NNMT在食管癌组织中高表达,下调NNMT可以抑制EC9706食管癌细胞增殖与侵袭,与阻断Wnt/β-catenin信号通路有关.
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