【摘 要】
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目的:构建反义VEGF基因真核表达载体,研究其对肾癌细胞VEGF表达的影响.方法:克隆人VEGF基因,将反义VEGF基因定向克隆于质粒pcDNA3.1(-)真核表达载体,酶切鉴定;转染人肾癌细胞
【机 构】
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浙江大学附属第一医院泌尿外科,郑州大学附属第一医院泌尿外科
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目的:构建反义VEGF基因真核表达载体,研究其对肾癌细胞VEGF表达的影响.方法:克隆人VEGF基因,将反义VEGF基因定向克隆于质粒pcDNA3.1(-)真核表达载体,酶切鉴定;转染人肾癌细胞,G418筛选阳性克隆.RT-PCR方法检测VEGFmRNA的表达,免疫组化法检测VEGF基因的蛋白表达,MTT法测细胞生长,流式细胞术检测细胞周期.结果:成功构建反义VEGF基因真核表达载体;反义VEGF组VEGFmRNA的表达受到抑制,明显低于空载体组和对照组VEGFmRNA的表达,空载体组VEGFmRNA的表
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