人载脂蛋白基因apoAI在毕赤氏酵母中的表达

来源 :复旦学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wxm2000

【摘要】

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将化学法合成的apoAI基因插入分泌型载体pPIC9K．将重组的pPIC9K—apoAI用BglⅡ酶切后，转化Pichia pastoris GS115菌株，筛选获得G418高抗性转化子．转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导，上清

【作者】

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张淼赵志安杨婷婷刘林宋大新

【机构】

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复旦大学生命科学学院

【出处】

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复旦学报：自然科学版

【发表日期】

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2004年2期

【关键词】

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人载脂蛋白ApoAI 分泌型载体毕赤氏酵母蛋白质印迹 N末端氨基酸顺序测定 human apolipoprotein AⅠ secretion vecto

【基金项目】

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复旦大学Med X基金重点资助项目 ,,上海市科学技术委员会资助项目 (0 2 4 3192 0 4 )

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将化学法合成的apoAI基因插入分泌型载体pPIC9K．将重组的pPIC9K—apoAI用BglⅡ酶切后，转化Pichia pastoris GS115菌株，筛选获得G418高抗性转化子．转化子经摇瓶发酵和甲醇诱导，上清液用SDS-PAGE检测，有明显的rApoAI表达．经Phenyl—sepharose 6(Fast Flow)疏水层析柱和Sephadex G-50(coarse)分子筛层析，得到rApoAI蛋白纯品．经Western blotting，N末端氮基酸顺序测定证明，毕赤氏酵母表达的rApo

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