地衣芽孢杆菌生麦芽糖α-淀粉酶的基因克隆与鉴定

来源 :应用与环境生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bear139
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以地衣芽孢杆菌ATCC14580基因组DNA为模板,PCR扩增出1.7kb大小的麦芽糖淀粉酶基因amyM,克隆入表达载体pET-28a(+),转化Escherichia.coliBL21(DE3),经IPTG诱导,测定麦芽糖淀粉酶酶活性.结果表明,麦芽糖淀粉酶基因amyM获得了活性表达,酶活力为3.797U/mL,SDS—PAGE电泳结果显示出相对分子质量约为67×10^3的特异性蛋白质条带.酶学性质分析表明,重组麦芽糖淀粉酶的最适反应温度为45℃,最适反应pH为6.5,在45℃以下的中低温环境
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