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根据GenBank中公布的粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）N-糖酰胺酶（PngIp）cDNA序列，设计并合成一对特异性引物，利用RT-PCR技术从粟酒裂殖酵母中克隆出糖酰胺酶cDNA。将得到的基因克隆到表达载体pET-15b中。重组质粒转入大肠杆菌BL2I（DE3）中，经诱导表达和纯化提取后，进行酶活测定。实验结果表明，该酶的分子量约为39kD，纯化后的重组N-糖酰胺酶可以对变性处理的糖蛋白进行糖链的切除，且这种作用需要还原剂DTF的辅助作用：N-糖酰胺酶只对错误折叠的糖