J亚群禽白血病病毒gp85基因的原核表达及间接ELISA方法建立

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aiming5968f
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为建立检测J亚群禽白血病病毒(ALV.J)?sg体间接ELISA方法,本实验根据已发表的ALV—Jgp85基因序列设计一对特异性引物,以该病毒cDNA为模板进行PCR扩增,将目的基因克隆于pET-28a(+)载体中,原核表达的重组蛋白约为381(u,经western blot分析表明,重组蛋白gp85具有良好的反应原性。以纯化的重组蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA抗体检测方法,该方法对其它相关的禽类病原无交叉反应,其组内和组间的变异系数均低于13%,具有良好的重复性。对458份l临床血清样品进行检测,
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