大鼠核转录因子Atoh1的克隆表达及鉴定

来源 :听力学及言语疾病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：rtreterter

【摘要】

：

目的利用基因工程方法克隆SD大鼠Atohl基因CDS区序列，构建大鼠核转录因子Atohl的真核表达载体并在真核细胞中表达。方法从两只SD大鼠结肠黏膜提取总RNA，采用逆转录PCR法扩增Ato

【作者】

：

郑国玺祝康侯瑾朱珠韦俊荣许珉

【机构】

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西安交通大学医学院第二附属医院耳鼻咽喉头颈外病院

【出处】

：

听力学及言语疾病杂志

【发表日期】

：

2011年5期

【关键词】

：

感音神经性聋 Atoh1 基因克隆真核表达载体 Sensorineural hearing loss Atohl Gene Clone Eukar

【基金项目】

：

国家自然科学基金（NO.30471877）、陕西省科技攻关项目（NO.2010K15-08）资助

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目的利用基因工程方法克隆SD大鼠Atohl基因CDS区序列，构建大鼠核转录因子Atohl的真核表达载体并在真核细胞中表达。方法从两只SD大鼠结肠黏膜提取总RNA，采用逆转录PCR法扩增Atohl基因CDS区序列并亚克隆于PMD一19T载体中。测序鉴定后将Atohl基因连接于含有EGFP和内部核糖体转入位点（IRES）的真核细胞表达载体pIRES2-EGFP中，对重组质粒进行酶切鉴定和测序鉴定后，以脂质体介导法转染至293T细胞，荧光显微镜和Westernblot检测其在293T细胞中的表达。结果扩增得到大

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