【摘 要】
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目的 探讨RNA相关蛋白LSM家族成员14A(LSM14A)在乙型肝炎病毒(HBV)感染中的功能及其潜在的分子机制.方法 通过慢病毒包装方法构建稳定敲低LSM14A的HepG2.2.15细胞株和稳定过表达LSM14A的HepG2.2.15细胞株,利用CRISPR/Cas9技术构建LSM14A敲除的HepG2.2.15细胞.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(Western印迹)检测敲低、过表达和敲除效果.利用RT-qPCR和Northern印迹杂交检测HBV RNA的表达水平;RT-q
【机 构】
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南华大学,湖南衡阳421001;军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所,蛋白质组学国家重点实验室,国家蛋白质科学中心(北京),北京100850;军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所,蛋白质组学国家重
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目的 探讨RNA相关蛋白LSM家族成员14A(LSM14A)在乙型肝炎病毒(HBV)感染中的功能及其潜在的分子机制.方法 通过慢病毒包装方法构建稳定敲低LSM14A的HepG2.2.15细胞株和稳定过表达LSM14A的HepG2.2.15细胞株,利用CRISPR/Cas9技术构建LSM14A敲除的HepG2.2.15细胞.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白免疫印迹(Western印迹)检测敲低、过表达和敲除效果.利用RT-qPCR和Northern印迹杂交检测HBV RNA的表达水平;RT-qPCR检测HBV DNA的表达水平;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测乙肝病毒表面抗原(HBsAg)和乙肝病毒e抗原(HBeAg)的表达水平.利用Western印迹检测下游分子,RT-qPCR检测干扰素的分泌.结果 在HepG2.2.15细胞中过表达LSMJ 4A可显著抑制HBV的复制,而敲低或敲除LSM14A可显著促进HBV的复制.过表达LSM14A后,p-TBK1、p-IRF3、Ⅰ型和Ⅱ型干扰素的表达水平均显著增加.结论 在HepG2.2.15细胞中LSM14A蛋白通过促进IRF3的磷酸化诱导Ⅰ型和Ⅱ型干扰素的表达,进而抑制HBV的复制.
其他文献
目的:对消化道癌症病人化疗期间不同症状体验进行症状群的研究,为进一步采取症状群联合干预方案提供指导。方法:采用便利抽样法选取某三级甲等综合医院肿瘤科化疗的207例消化道癌症病人,运用一般资料调查表、安德森症状调查量表进行问卷调查,获取病人的症状体验,进行分析和分类;并分别根据症状发生率和严重度进行探索性因子分析,提取症状群,比较和分析症状群的稳定性。结果:消化道癌症病人化疗期间存在多种症状,发生率最高的症状为疲乏,其次为食欲下降、口干;相对较严重的症状为食欲下降,其次为疲乏、恶心;症状造成的困扰依次为对一
目的:探讨血清性激素水平检测在精神分裂症病人风险评估与护理干预中的应用价值。方法:选取2018年7月—2020年5月医院收治的179例精神分裂症病人为研究对象,并根据血清性激素中的血清泌乳素水平将其分为观察组(n=92)和对照组(n=87),采用阳性与阴性症状量表(PANSS)及护士用住院病人观察量表(NOSIE)评估病人精神症状的严重程度,并进行风险评估。比较两组病人的PANSS评分、NOSIE评分及风险评估结果。结果:观察组病人的PANSS阳性症状评分和NOSIE总消极因素评分均明显高于对照组(P&l
目的 制备α-芋螺毒素GI抗血清,为其中毒救治提供有效手段.方法 构建包含α-芋螺毒素GI、PADRE和破伤风毒素C片段(TTC)融合蛋白的原核表达载体,原核表达GI-PADRE-TFC融合蛋白抗原,免疫BALB/c小鼠,获得抗血清.采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清抗体滴度,并测定其对小鼠的抗毒活性.结果 获得GI-TTC融合蛋白69.5 mg.GI-TTC融合蛋白免疫小鼠第5次免疫后血清对GI、GI-BSA的抗体滴度分别达到1∶102400及1∶204800.100、200 μl融合蛋白抗血清
目的 探讨空军青少年航空学校(简称青航校)学员飞行适应能力与视力、屈光状态和隐斜等医学选拔指标之间的关系,分析空军招收飞行学员(简称空军招飞)医学选拔标准是否合理,为空军招飞医学选拔标准修订提供理论依据.方法 选取12所青航校2020届毕业学员作为研究对象,对学员进行飞行适应能力评估,按空军招飞医学选拔相关要求进行体格检查,对不同飞行适应能力评分的学员身高、体质量、视力、屈光状态及隐斜等医学选拔指标进行统计分析.结果 飞行适应能力达标的学员裸眼视力(P=0.003)和屈光状态(P=0.027)医学选拔合格
摘要：抵抗地震灾害这个课题一直深受学者们关注，土木工程中抗震设计是结构设计的重要内容，消能减震结构设计是近来较为热门的抗震设计思路，由于该技术在计算机分析上较为复杂，一般工程设计人员常产生畏难情绪，期望有相对简化一些的设计方法出现。本文提出一种新的消能减震结构设计方法，并结合工程实例验证了此方法的合理性和适用性，介绍了新方法的具体步骤，此种方法为消能减震结构设计提供一种新的思路，工程设计人员进行结
现代化战争中,高新技术武器应用、指挥决策、紧急任务、高强度作战等特殊环境下对军人军事作业能力的要求不断提高.在极端军事环境下,军人必须时刻保持敏锐而正确的指挥判断力及良好的身体素质.安全、有效的药物干预是复杂条件下保证高水平军事作业能力的有力保障.该文概括了节律调节、提升认知能力和机体效能的代表性药物及给药方式,为提升我军战斗力提供参考.
目的:观察Caprini血栓风险评估模型用于预测电视胸腔镜(VATS)肺癌根治术后静脉血栓栓塞(VTE)的价值,以指导临床合理预防VTE发生。方法:选择2018年1月—2020年1月医院行VATS肺癌根治术的204例肺癌病人作为研究对象,于术后采用Caprini及Padua血栓风险评估模型评估病人VTE风险,并记录病人VTE发生情况,分析Caprini及Padua血栓风险评估模型对VATS肺癌根治术后VTE发生的预测价值。结果:204例VATS肺癌根治术病人的VTE发生率为10.78%;VTE病人Capr
目的:通过访谈深入了解乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染产妇(以下简称乙型肝炎产妇)母乳喂养失败的心理体验,探究导致母乳喂养失败的原因。方法:采用立意抽样法,选取2019年11月20日—2019年12月10日江苏省某传染病专科医院足月生产且母乳喂养失败的12例乙型肝炎产妇,运用Colaizzi 7步分析法对资料进行分析、总结、归纳和提炼。结果:乙型肝炎产妇母乳喂养失败的原因提炼为不知能否母乳喂养(表现为母婴阻断和母乳喂养相关知识欠缺)、不敢母乳喂养(表现为心理压力大、担心新生儿
目的:分析2010年—2019年授权在我国护理领域的研究热点,了解授权在我国护理领域的研究进展。方法:以中国知网、万方数据知识服务平台、维普期刊资源整合服务平台所收录的有关护理授权的论文为研究对象,使用Bicomb软件对其进行数据提取和文献计量学分析,采用gCLUTO软件进行聚类分析。结果:最终纳入文献541篇,提取高频关键词34个,占总频次累计百分比43.45%。通过聚类分析将2010年—2019年的研究主题分为授权与护士结果变量的关系、病人授权及家庭授权护理的应用、授权教育在病人自我管理中的作用、授权
目的:探讨团体认知护理沟通对双相情感障碍躁狂发作病人认知能力和社会功能的影响。方法:选取2018年6月—2020年1月医院收治的50例双相情感障碍躁狂发作病人,按电脑分层随机法分为对照组与观察组,各25例。对照组接受常规护理干预,观察组联合团体认知护理沟通干预,比较两组病人认知功能、社会功能、躁狂症状改善情况及生活质量。结果:观察组病人护理后蒙特利尔认知评估量表(MoCA)、个人与社会功能评定量表(PSP-CHN)、简易生存质量测定量表(QOL-100)评分均明显高于对照组(P<0.05),而躁狂症