新城疫病毒F48E9株P基因的克隆及鉴定

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:owen1986
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根据NDV P蛋白己知基因序列设计合成了一对引物PU/PL,利用RT-PCR扩增出了F48E9株P基因1272bp的片段,将该片段克隆到pMD18-T Vector上,并对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定,结果证明我们得到了这个基因片段的阳性重组子.为了更充分证实所得阳性质粒的可靠性,采用Sangers双脱氧末端终止法对阳性重组子从5端进行核苷酸序列测定,获得了F48E9株P基因片段5端的基因序列,利用DNASIS分析软件,将F48E9株与La Sota株的相应序列进行比较,其核苷酸序列同源性为83.7%.至此,我们获得了F48E9株P基因的全长克隆.
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