大肠杆菌表达腺苷蛋氨酸合酶及产酶条件优化

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腺苷蛋氨酸(adenosymethionine,SAM)是人体中重要的代谢中间体,在医疗上被广泛应用于治疗肝炎,抑郁症以及关节炎等疾病.酶法进行腺苷蛋氨酸的生产具有良好的工业前景.将来源于酿酒酵母BY4741中的腺苷蛋氨酸合酶基因(sam2)进行密码子优化后,与pET-28a(+)和pET-3b(+)进行连接获得重组质粒pET-28a(+)-sam2和pET-3b(+)-sam2,分别实现其在E.coli BL21(DE3)和E.coli Rosetta(DE3)中的异源表达,结果表明,重组菌E.coli BL21/pET-28a(+)-sam2的SAM酶活较高,达到0.184 U/mL.对该重组菌株进行发酵条件优化,在最优条件下,SAM合酶最高酶活为0.245 U/mL,比优化前提高34%.
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