【摘 要】
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目的 胆固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)是调控脂类代谢的重要转录因子,其与代谢性疾病密切相关.V-ATPase作为持家基因,通过全酶的聚集和解离调节酶的活性.目前尚未有关于V-ATP
【机 构】
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楚雄医药高等专科学校,云南楚雄675000;化学与生命科学学院,云南楚雄675000;成都中医药大学,四川,成都610032;昆明医科大学第一附属医院,云南,昆明650032;云南中医药大学第一附属医
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目的 胆固醇调节元件结合蛋白(SREBPs)是调控脂类代谢的重要转录因子,其与代谢性疾病密切相关.V-ATPase作为持家基因,通过全酶的聚集和解离调节酶的活性.目前尚未有关于V-ATPase及其所在通路调控SREBP的相关报道.方法 构建基因重组质粒,PCR法扩增V-ATPase基因片段,并将其插入表达载体pcDNA3.1质粒,构建基因重组质粒pcDNA3.1-V-ATPase,将目的质粒pcDNA3.1-V-ATPase及对照质粒pcDNA3.1分别转染大鼠肾小球系膜细胞.采用WesternBlotting、q-PCR、荧光显微观察等方法研究V-ATPase和SREBPs的关系.结果 发现V-ATPase功能缺失抑制大鼠肾小球系膜细胞脂肪积累,V-ATPase调控SREBP的功能具有保守性,V-ATPase调控SREBP-1的入核不依赖于泛素化降解,V-ATPase调控SREBP-1的核积累依赖于溶酶体的pH值.结论 上述结果说明V-ATPase是新的调控SBP-1的基因.这为寻找新的调控SREBP的因子,并研究其调控脂质代谢的作用机制提供了依据.
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