探讨钠氢交换体-1(NHE1)基因敲降对缺氧状态下巨噬细胞三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)蛋白水平及胆固醇外流的影响。

感染表达特异靶向NHE1基因短发夹RNA慢病毒(siNHE1)或表达乱码RNA慢病毒(siNC)的RAW264.7细胞缺氧24 h，实时定量PCR(qRT-PCR)及免疫印迹(Western blot)检测NHE1 mRNA及蛋白表达水平，用SNARF-1、Fluo-4 NW及Suc-LLVY-aminoluciferin分别检测NHE1活性、细胞内钙离子浓度(〔Ca^2＋〕_i)及钙蛋白酶(calpain)活性；免疫印迹检测缺氧状态下ABCA1蛋白水平，高效液相色谱法检测细胞内胆固醇含量及³H-胆固醇法检测胆固醇外流。

缺氧相对于常氧上调NHE1 mRNA、蛋白水平表达及活性2.48倍、1.28倍和61.96%(P<0.05)，升高〔Ca^2＋〕_i及calpain活性4.51倍和2.41倍(P<0.05)，而siNHE1降低缺氧细胞NHE1mRNA、蛋白表达及活性84.95%、60.75%和66.44%(P<0.05)，降低〔Ca^2＋〕_i及calpain活性59.23%和54.66%(P<0.05)。缺氧使ABCA1蛋白水平降低61.67%(P<0.05)，siNHE1使缺氧细胞ABCA1蛋白水平升高56.52%。缺氧使细胞内总胆固醇及胆固醇酯含量增加74.57%和101.81%(均P<0.05)，而siNHE1降低总胆固醇及胆固醇酯34.24%及49.66%(均P<0.05)。缺氧降低胆固醇外流34.79%，而缺氧条件下siNHE1使胆固醇外流率升高37.80%。

NHE1可能通过〔Ca^2＋〕_i/calpain通路在缺氧诱导ABCA1蛋白水平降低及胆固醇外流异常发挥重要作用。