【摘 要】
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质粒pBR322用Hind Ⅲ-BamH Ⅰ双酶切作为载体,从质粒pPA4上克隆含有pac操纵基因的HindⅢ-Bgl Ⅱ 1.65kb的DNA片段,得到质粒pPA41。质粒pBR322和pPA41转化染色体上含有完整pac
【机 构】
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中国科学院上海生物工程研究中心,中国科学院上海药物研究所
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质粒pBR322用Hind Ⅲ-BamH Ⅰ双酶切作为载体,从质粒pPA4上克隆含有pac操纵基因的HindⅢ-Bgl Ⅱ 1.65kb的DNA片段,得到质粒pPA41。质粒pBR322和pPA41转化染色体上含有完整pac操纵子的大肠杆菌D816,进行操纵基因滴定。大肠杆菌D816、D816(pPA41)、D816(pBR322)在22℃摇瓶发酵96h,NIPAB法测定青霉素酰化酶活性。结果发现,在不加诱导剂时,D816(pPA41)产生的青霉素酰化酶是D816细胞的2.5倍;在加诱导剂时,D816(p
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