【摘 要】
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为了建立烟用纸张中大肠杆菌的快速检测方法,使用pH敏感型荧光染料异硫氰酸荧光素对氨基修饰的磷脂聚乙二醇进行共价修饰制备纳米胶束单体,通过自组装在磷酸盐缓冲溶液中形成
【机 构】
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国家烟草质量监督检验中心; 河南中烟工业有限责任公司技术中心;
【基金项目】
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国家自然科学基金青年项目“基于核酸适配体-纳米胶束的荧光多标记生物传感器检测8-羟基-2’-脱氧鸟苷”(21507020);国家烟草质量监督检验中心创新项目“烟用纸张大肠菌群、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和霉菌的快速检测方法”(512013CA0120)
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为了建立烟用纸张中大肠杆菌的快速检测方法,使用pH敏感型荧光染料异硫氰酸荧光素对氨基修饰的磷脂聚乙二醇进行共价修饰制备纳米胶束单体,通过自组装在磷酸盐缓冲溶液中形成荧光纳米胶束,加入到热琼脂溶液中制备荧光传感凝胶,荧光传感凝胶和大肠杆菌液体培养基通过水相滤膜隔离构建大肠杆菌荧光传感器,大肠杆菌荧光传感器通过检测大肠杆菌生长过程中pH的变化实现大肠杆菌的快速检测。结果表明:(1)制备的纳米胶束的粒径为100～500 nm,激发和发射波长分别在480和520 nm;传感凝胶在pH 4.5～9.0之间随pH的升高,荧光信号快速增加。(2)构建的大肠杆菌荧光传感器基于传统培养理论可以实现烟用纸张中大肠杆菌的快速检测,检测时间相比传统平板计数法大幅缩短,可以用来评估烟用纸张中微生物的数量。
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