HBx基因真核表达载体的构建及表达

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目的构建重组HBx蛋白的真核表达载体plRES2-AcGFP-HBx。方法设计合成HBx基因的特异性PCR引物,PCR扩增获得HBx基因序列;将HBx基因序列克隆入T载体(pGEMT—HBx);再用限制性内切酶BglII和E(oRI双酶切下目的片段,将其亚克隆人真核表达载体plRES2-AcGFP;双酶切(BglII和EcoRI)和序列测定鉴定重组子;脂质体包裹pIRES2-AcGFP—HBx转染人HepG2细胞,G418筛选得到稳定表达HBx的细胞克隆,Westernblot检测HBx蛋白在转染细胞中的
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