HSP70基因的克隆与表达

来源 :免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zhangruidao11

【摘要】

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目的构建HSP70真核表达质粒以用于肾脏缺血预适应中HSP70作用及机制研究.方法用肝癌细胞系HepG2,用RT-PCR方法扩增HSP70cDNA,并利用T载体作为过渡,将HSP70基因克隆到真核表达

【作者】

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金欢胜吴雄飞金锡御杨青浩倪兵

【机构】

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第三军医大学西南医院肾科,第三军医大学西南医院肾科,第三军医大学新桥医院泌尿外科,第三军医大学基础部全军免疫学研究所

【出处】

：

免疫学杂志

【发表日期】

：

2005年3期

【关键词】

：

HSP70 缺血预适应真核表达质粒肾脏 HSP70 Ischemia precondition Eukaryotic rexpressing plami

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目的构建HSP70真核表达质粒以用于肾脏缺血预适应中HSP70作用及机制研究.方法用肝癌细胞系HepG2,用RT-PCR方法扩增HSP70cDNA,并利用T载体作为过渡,将HSP70基因克隆到真核表达载体pAAV-MCS中.重组质粒转染NIH3T3细胞,Western-blot法鉴定重组质粒HSP70/pAAV-MCS能在哺乳动物细胞中正确表达.结果 RT-PCR方法正确地扩增出了全长HSP70基因.限制性内切酶酶切和测序结果证实HSP70基因克隆完全正确.重组质粒转染哺乳动物细胞系NIH3T3后,ECL

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